[영농활용]  Rapid Diagnosis Method of Ginseng Root Rot using Real-time PCR

정량 PCR법 이용 인삼뿌리썩음병 신속진단기술

연구배경

  • 인삼 재배적지 부족으로 연작장해에 의한 생산성 및 품질 저하
  • 재배적지 선정 및 관리, 무병 묘삼 확보 등을 위한 인삼 연작장해 주요 원인균인 실린더로카폰 데스트럭턴스(Cylindrocarpon destructans) 에 대한 유전자기법을 도입한 사전 진단기술 개발 필요

주요 연구성과

  • 정량 PCR(real-time PCR) 진단과정
  • – 시료채집 → DNA 추출 → 정량PCR 시약 첨가 → 정량 PCR(기기) → 결과해석
  • ※ 분석기기는 정량 PCR 기기를 사용하며, 뿌리썩음병원균 DNA를 증폭하는 동시에 실시간으로 모니터링하여 병원균 존재여부 진단
  • → 최종 증폭된 병원균 DNA를 전기영동으로 PCR 증폭 후 확인하는 기존 방법보다 진단시간 단축(기존 5시간 → 2시간)
정량 PCR(real-time PCR) 진단과정

정량 PCR(real-time PCR) 진단과정

화살표

정량 PCR(real-time PCR) 진단과정

화살표

정량 PCR(real-time PCR) 진단과정

화살표

정량 PCR(real-time PCR) 진단과정

  • 검출효율
  • – 기존의 PCR 기기를 이용하는 것보다 검출효율이 10∼100배 높음

[진단시약 구성]

진단시약 구성
키트 구성 시약 Volume(㎕) 보 관 반응액 조제(㎕)

프라이머/프로버 믹스

250

1 튜브

5

2x real-time PCR master mix

500

1 튜브

10

Control DNA

50

1 튜브

※ 진단시약 공급 및 사용법 문의 : 소득자원연구소 인삼연구팀

기대효과

  • 인삼 뿌리썩음병 사전진단에 의한 피해 최소화로 안정생산 기반구축
연구자 : 경기도농업기술원 소득자원연구소 김진영, 031-229-6184, kjy5122@gg.go.kr