톱밥 및 액체 종균오염 간이진단 방법 개발

 
연구성적(’06, 경기도원) :
 
가. 톱밥종균 발색반응

톱밥종균 발색반응

처리구	춘추2호 (대조구)	세균성갈반병 (Pseudomonas sp.)		푸른곰팡이 (Trichoderma sp.)
		춘추2호 +P. tolaasii	춘추2호 +P. agarici	춘추2호 +T. koningii	춘추2호 +T.harzianum	춘추2호 +T.atroviride
발색 반응
	황색	선홍색	선홍색	적색	적색	황색

※ 검정배지 : YPLP배지(Yeast Extract 4.5g, Peptone 7.5g, Lactose 5.0g)+Phenol red 10㎖
검정시간 : 접종 후 48시간, 검정배지 배양온도 25℃
 
나. 액체종균 발색반응

액체종균 발색반응

처리구	춘추2호 (대조구)	세균성갈반병 (Pseudomonas sp.)		푸른곰팡이 (Trichoderma sp.)
		춘추2호 +P. tolaasii	춘추2호 +P. agarici	춘추2호 +T. koningii	춘추2호 +T.harzianum	춘추2호 +T.atroviride
발색반응
	황색	적색	적색	선홍색	선홍색	선홍색

※ 검정배지 : YPLP배지(Yeast Extract 4.5g, Peptone 7.5g, Lactose 5.0g)+Phenol red 10㎖
검정시간 : 접종 후 48시간, 검정배지 배양온도 25℃
 
다. 진단방법

 
적요 :
○ 춘추2호 톱밥종균을 배양하여 YPLP배지에 2일(48시간 이상) 동안 배양하여 측정한 결과 건전한
톱밥종균은 황색으로 변화가 없었고, 오염종균은 황색→적색으로 변하였음.
○ 춘추2호 액체종균을 배양하여 YPLP배지에 2일(48시간 이상) 배양하여 측정한 결과 건전한
액체종균은 황색으로 변화가 없었고, 오염종균은 황색→적색으로 변하였음.
 
개발기술의 활용방법 :
○ 오염균의 검정방법
– YPLP 진단배지 재료 : Yeast Extract 4.5g + Peptone 7.5g + Lactose 5.0g + agar 20g + Phenol Red지시약 10㎖
※ Phenol red 제조 : 99% 에탄올 1ℓ에 phenol red를 1g 넣어 녹임
– 진단배지 재료를 용기에 담아 증류수1ℓ에 넣어 녹임
※ 배양전 배지의 색은 주황색이며, 진단배지는 pH 7로 보정
– 고압살균기에서 121℃, 20분간 고압살균
– 무균상 안에서 지름 10cm의 페트리디쉬에 YPLP진단배지 약 10㎖을 넣어 굳힘
– 의심되는 종균을 YPLP배지에 접종
– 25℃에서 24～48시간 배양
– 주황색에서 황색으로 변하면 정상
– 주황색에서 적색 또는 선홍색으로 변하면 오염